生物監測能夠直接反映滅菌過程對微生物的 殺滅能力和效果，是最重要的監測手段[17]。所用的 生物指示物常以嗜熱脂肪地芽孢桿菌(Geobacillus  stearothermophilus，ATCC 7953)的芽孢，作為試驗微 生物。根據構造，生物指示物分為菌片式生物指示 物和自含式生物指示物。菌片式生物指示物需要相 同批號未滅菌的菌片和無菌培養基分別作為陽性 對照和陰性對照，而自含式生物指示物因可以有效 防止外界雜菌的污染，故只需做陽性對照。自含式 生物指示物主要有兩類，第一類是對暴露溫度、暴 露時間和飽和蒸汽都敏感的，用于非液體滅菌監測 的指示物，第二類是僅對暴露溫度和暴露時間敏感 的，用于液體滅菌監測的芽孢安瓿。

自含式生物指示物因使用方便，被廣泛用于蒸 汽滅菌效果監測。此類指示物既可以單獨使用，又 可以聯合使用。單獨使用時必須將其置于滅菌包或 者滅菌盒內最難滅菌的部位，否則監測無意義。聯 合使用時需要將其放入自制PCD或市售PCD，然后將v> PCD置于滅菌器最難滅菌的部位（一般為排氣口上方 靠近柜門處）。隨著技術的進步，這種指示物的培養 時間由48 h縮短至3 h，甚至1 h。實驗室可根據經費情 況和對滅菌物品放行效率的要求，選擇使用。只要陽 性結果出現，就可以停止培養。實際上對于要求培養 48 h的普通生物指示物，如果滅菌不合格，在培養8 h 后，雖然培養基的顏色未完全變成黃色，但是在菌片 周圍已有肉眼可見的顏色變化。需要注意的是，由于 培養基量少，為防止在培養時透過蓋子內側的過濾 材料蒸發，建議用膠帶密封指示物的蓋部。

 指示卡

指示卡類型眾多，每類都有其特殊的反應性 質。使用者應該根據標定值選擇合適的指示卡，而不 應將其用于制造商規定之外的滅菌過程。例如，美國 3M公司生產的爬行式包內化學指示卡1243A，屬第 五類整合化學指示物。其在121 ℃、128 ℃和135 ℃ 上的時間標定值依次為25.1 min、6.0 min和2.3 min。 只有在滅菌溫度和滅菌時間都達到下限后才能指示 “通過”。但是，“通過”只能證明被滅菌物品經歷了 一個特定參數的處理過程，而不能證明被滅菌物品 是無菌的。無菌與否還需結合物理、生物監測。為了 使指示結果具有代表性和說服力，對于有包裝的負 載，應該把指示卡放在滅菌袋或包裝盒中蒸汽最難 到達的區域（冷點），而非中心部位。對于無包裝的負 載，可以把化學指示卡放在負載內或托盤里]。